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Doklady. Biochemistry and biophysics. 2025 Apr 11. doi: 10.1134/S1607672924601136 Q40.82025

Optimization of A549 Cell Transfection Efficiency with a Plasmid Encoding the N-Protein of the SARS-CoV-2 Virus

含SARS-CoV-2 N蛋白质粒的A549细胞转染效率优化研究 翻译改进

Yu V Khramtsov  1, T N Lupanova  1, A A Rosenkranz  1  2, G P Georgiev  1, A S Sobolev  3  4

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作者单位

  • 1 Institute of Gene Biology, Russian Academy of Sciences, Moscow, Russia.
  • 2 Moscow State University, Moscow, Russia.
  • 3 Institute of Gene Biology, Russian Academy of Sciences, Moscow, Russia. alsobolev@yandex.ru.
  • 4 Moscow State University, Moscow, Russia. alsobolev@yandex.ru.
  • DOI: 10.1134/S1607672924601136 PMID: 40216710

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    To test new antiviral drugs aimed at degrading the nucleocapsid protein (N-protein) of the SARS-CoV-2 virus, it is desirable to have cells expressing the N-protein, for which it is necessary to find conditions for the maximum achievable efficiency of cell transfection with a plasmid encoding this protein. For transfection, polyplexes were used consisting of a plasmid encoding the N-protein fused with the mRuby3 fluorescent protein and polyethyleneimine (PE... ...
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    为了测试旨在降解SARS-CoV-2病毒核衣壳蛋白(N蛋白)的新型抗病毒药物,需要有表达该蛋白的细胞。为此,有必要找到使细胞转染含有编码此蛋白质粒效率达到最大的条件。在转染过程中使用了由编码与mRuby3荧光蛋白融合的N蛋白的质粒和聚乙烯亚胺(PEI)-聚乙二醇(PEG)-TAT肽嵌段共聚物组成的聚复合物。研究了人肺腺癌A549细胞转染效率随PEG/PEI比例及N/P比值(PEI中的氮与DNA中磷酸根的比例)变化的依赖关系。通过流式细胞术测定的转染效率、N/P比率以及尺寸在40-54 nm范围内的聚复合物所占比例之间存在显著正相关性。获得的数据可以作为建立一种瞬时表达SARS-CoV-2病毒核蛋白的动物肺细胞模型的基础。

    关键词:
    SARS-CoV-2;动态光散射;流式细胞术;核衣壳蛋白;聚乙烯亚胺;聚复合物。

    © 2025. Pleiades Publishing, Ltd.


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    期刊名:Doklady biochemistry and biophysics

    缩写:DOKL BIOCHEM BIOPHYS

    ISSN:1607-6729

    e-ISSN:1608-3091

    IF/分区:0.8/Q4

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