在 2022-2023 赛季，夏威夷（Coffea arabica）收获的咖啡作物价值为5710万美元（USDA NASS 2023）。2022年9月，在夏威夷霍纳乌努阿采集了受叶斑病影响的科纳典型品种咖啡叶片样本，发病率低于10%。症状表现为圆形、坏死型叶斑，边缘呈黄色，并且这些叶斑会融合在一起，导致整个叶片被覆盖并最终落叶。在叶片背面有分生组织结构（sporodochia）。对受感染的叶组织进行消毒处理后，在水琼脂和马铃薯葡萄糖琼脂（PDA；Difco, USA）上分离出纯培养物，并且这些培养物具有白色气生菌丝，分生组织排列成同心圆环结构，形成橄榄色至黑色的孢子簇。分生孢子无隔膜、透明、光滑、柱状，长度为5.1到6.8μm，宽度为1.7到2.3μm（n=50）。根据症状学和培养/形态特征（Huaman-Pilco et al. 2023; Lombard et al. 2016; Pelayo-Sanchez et al. 2017），初步鉴定这些分离物为Paramyrothecium roridum(Tode) L. Lombard & Crous, comb. nov.(同义词Myrothecium roridum Tode)。通过BLAST分析隔离体P22-81-2的PCR产物（包括rDNA内部转录间隔区(ITS)区域，β-tubulin (βtub)，RNA聚合酶II (RPB2) 和钙调蛋白基因）进一步确认了真菌鉴定结果。（White et al. 1990; Lombard et al., 2016; Huaman-Pilco et al., 2023）。这些基因序列（GenBank登录号PP211198，PQ192517-19）与P. roridum 类型标本(CBS 357.89)的相似度大于98.4%。通过多基因最大似然法构建系统发育树，利用先前相关研究（Lombard et al., 2016; Pinruan et al. 2022）中的序列数据进一步确认物种鉴定结果。为了证明病原性，在四个两岁半的科纳典型品种咖啡幼苗上使用香水喷雾器以每毫升含有1 x 10⁶ 孢子的悬浮液进行叶面接种处理。另外，四个植物以相同的方式用无菌水进行接种作为对照组。所有植物都在上下叶面进行了充分喷洒，并在塑料袋中保持湿度90%至100%，温度为24°C的情况下培养了48小时。48小时后，将植物从袋子移出，在温室长凳上放置并每周观察一次症状的发展情况。七天内所有接种的植物出现了淡棕色凹陷斑点，这些斑点继续扩大，并形成具有深色边缘、浅褐色中心和黄化晕圈以及同心圆环结构，与原患病样本完全相同。对照组植物没有出现任何叶斑病症状。试验进行了两次。从受感染叶片上始终可以重新分离出P. roridum 真菌，并且在PDA培养基和分子水平（ITS, βtub, RPB2, calmodulin）鉴定中，满足了科赫氏法则的要求。据我们所知，这是首次报道P. roridum 在夏威夷的C. arabica 植株上引起叶斑病的情况。该病原体在世界其他地区的咖啡作物上也有报道，包括哥伦比亚、哥斯达黎加、危地马拉、波多黎各和墨西哥（USDA Fungus-Host Database）。在适当的条件下，P. roridum 有可能导致叶斑病和落叶现象，从而给夏威夷的咖啡种植者带来经济损失。

关键词： 致病因子；咖啡；病因学；真菌；研究领域。